首先,我們來了解一下登革熱及登革熱病毒。
登革熱的病原是登革熱病毒(Dengue virus;DENV),屬黃病毒科黃病毒屬。已知有 4 種不同的血清型(登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)。登革熱的潛伏期一般為3~15天,多數5~8天。由于目前沒有一種有效疫苗來預防登革熱,也沒有特效治療方法,若重復感染不同型別的登革熱病毒,可能造成癥狀嚴重的出血性登革熱(如消化道大出血等),其惡性度高,嚴重時可致人死亡。
登革熱以伊蚊為媒介傳播,典型癥狀包括持續發熱、頭痛、肌肉痛、關節痛等。主要發生在熱帶和亞熱帶地區,比如今年的東南亞多地如菲律賓、泰國、越南和緬甸都發生過登革熱疫情。多發于夏秋季(高峰在7~9月),2014年秋我國的廣東省曾出現登革熱疫情,今年9月5日至9月13日,海南省已報告登革熱病例105例。
國慶將至,我們必須提醒大家前往登革熱高發國家和城市旅游時,需提高自我保護意識,做好防蚊、個人保護措施。
那么發現有高熱、頭痛等癥狀,如何鑒別是否感染了登革熱病毒呢?
且看以下幾種方法~
1、使用血清學方法時,黃熱病毒屬,特別是登革熱病毒的血清型之間有嚴重的交叉反應。并且在登革熱病毒二次感染時,由于多種黃病毒都被計算在內,使用血清學方法來確認正在感染的登革熱病毒往往是不可能的。
2、
細胞培養分離病毒是檢測病毒的金標準,但有局限性。
(1)、細胞培養病毒分離的檢測窗口只有一至兩天,機會稍縱即逝。
(2)、抗體的增加會感染病毒分離。
(3)、基于生物安全的考慮,采用細胞培養病毒分離的方法對實驗室的要求特別高,很多實驗室達不到標準無法開展檢測工作。
3、目前,蕞可靠和準確的方法是基于PCR技術,特別是熒光定量PCR方法,它可以比病毒分離和抗體實驗更快更靈敏地獲得結果。
為了有效篩查登革熱感染人員,盡快檢測和確診以加速治療,減輕病人的痛苦,朗基科儀蕞新優化出一套快速、準確檢測登革熱病毒的整體解決方案。作為國內當先的生命科學儀器設備等解決方案的高科技企業,杭州朗基科儀責無旁貸。
qPCR檢測登革熱病毒的金方案
1、樣品前處理&核酸提取方案
按相關標準要求采集樣品(全血、血清等)。短期樣品可存放在-20℃,長期保存可存放于-80℃(不能超過6個月)。按病毒RNA提取試劑盒說明書處理樣品并提取核酸,根據需要可配備核酸提取儀。
2、準確&快速的檢測平臺
根據日常待檢樣品的數量,用戶可選擇便攜式熒光定量PCR儀【Q160型】、快速熒光定量PCR系統【Q1000+型】,或者高通量熒光定量PCR系統【Q2000C型】。
Q160型
16孔雙通道設計,適合小型機構。
無需電腦、直出結果。
所有樣品孔熒光檢測同時進行,
無邊緣效應。
光學系統固態設計,無運動部件。
設計精巧,審美在線,便于攜帶。
Q1000+型
最快變溫速率可達7度/秒,
48孔4通道,所有樣品同時檢測,
大大縮短檢測時間。
專門為各類病毒檢測開發的陰陽性判定和直出報告功能,
讓用戶檢測后無需再手動整理檢測結果。
Q2000C型
96孔多通道設計( 最多可達6通道 )。
專利技術,短光程靜態(SSLP)
熒光CCD成像技術。
滿足一次篩查大量樣品和多種病毒的要求。
屏幕角度可自由調節。
3、與進口媲美的耗材
我們特別定制高品質的白色反應管來保證檢測結果的靈敏度和一致性,白管可屏蔽背景干擾,可獲得比透管更佳的檢測效果(見下圖)。
實驗效果圖
4、檢測登革熱病毒的儀器
便攜式熒光定量PCR儀Q160型 | 杭州朗基科學儀器有限公司 |
快速熒光定量PCR系統Q1000+型 | 杭州朗基科學儀器有限公司 |
高通量熒光定量PCR系統Q2000C型 | 杭州朗基科學儀器有限公司 |
病毒RNA提取試劑盒 | 北京億森寶生物科技有限公司(科研用) |
登革熱病毒通用單重熒光PCR檢測試劑盒 登革熱病毒Ⅰ型單重熒光PCR檢測試劑盒 登革熱病毒Ⅱ型單重熒光PCR檢測試劑盒 登革熱病毒Ⅲ型單重熒光PCR檢測試劑盒 登革熱病毒Ⅳ型單重熒光PCR檢測試劑盒 登革熱Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒 四重熒光PCR檢測試劑盒 |
中山大學達安基因股份有限公司 北京億森寶生物科技有限公司 (臨床用、科研用) |
0.1ml PCR 8聯管 + 光學平蓋 (隨機附送100條) | 杭州朗基科學儀器有限公司 |
迷你離心機CK-6(杭州朗基) | 一臺 |
生物安全柜(B2等級) | 一臺 |
渦旋振蕩器 | 一臺 |
醫用冰箱 (4℃/-20℃直冷不帶自動除霜功能) | 一臺 |
低溫冰柜 (-20℃或以下) | 一臺 |
可調式移液器 (10μl、200μl、1000μl) | 各一支 |
臺式高速離心機 (12000轉以上) | 一臺 |
干式恒溫器 | 一臺 (可選,取決于所用核酸提取試劑盒的要求) |
專用定時器 | 一臺 |
電腦Win7或Win10系統, 4G或以上內存,帶網線接口 | 一臺 |
噴墨打印機 | (可選,用于打印報告) |
5、檢測登革熱病毒的耗材
1.5ml/2ml 無核酸酶的離心管 | 若干 |
5ml/10ml 無核酸酶的采血管+采血針套裝 | 若干 |
0.5ml/1.5ml/2ml 雙面離心管架 | 一套 |
0.1ml/0.2ml 96 孔離心管盒 | 一套 |
0.5ml/1.5ml/10ml/50ml 四面離心管架 | 一套 |
無核酸酶的蒸餾水 | 一瓶 |
無核酸酶的生理鹽水 | 一瓶 |
無水乙醇 | 兩瓶 |
無核酸酶帶濾芯吸頭 10μl/200μl/1000μl | 各一盒 |
酒精棉球 | 若干 |
75%酒精消毒噴霧 | 一瓶 |
油性記號筆 | 一支 |
采樣拭子 | 若干 |
鑷子 | 兩把 |
無菌注射器 | 若干 |
醫用托盤 | 一個 |
酒精燈 | 一個 |
實驗服 | 若干套 |
一次性無粉乳膠手套 | 若干 |
一次性口罩 | 若干 |
一次性帽子 | 若干 |
鞋套 | 若干 |
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*參考資料:
360百科“2019年登革熱疫情”;
醫學百科“登革熱病毒”;
鳳凰海南官微“海南人注意!登革熱進入高發季,出現這些癥狀趕緊就醫”;
北京大學第三醫院“去趟海島怎么就得了登革熱?;
南海網“海南省衛健委發布登革熱防與治十問十答”;
中國甘肅網“海南30例登革熱患者已解除隔離 無重癥和死亡病例”;
三亞新聞網“海南確定登革熱定點診治醫療機構”;
生物探索“紐羅西敏隆重推出基孔肯雅熱登革熱多重PCR試劑”。